Интернет-журнал "Домашняя лаборатория", 2007 №5

Журнал «Домашняя лаборатория»

Ход работы.

1. В условиях ламинар-бокса извлечь каллус из пробирки и перенести на стерильную поверхность. Стерильной препарировальной иглой выделить зону морфогенного каллуса (белые мелкие клетки, каллус средней плотности).

2. Стерильной препарировальной иглой перенести кусочек (5–6 мм) морфоген ного каллуса в пробирку со средой для регенерации, закрыть пробирку стерильной пробкой.

3. Перенести штативы с пробирками в световую культуральную комнату с температурой 25 + 2 °C, влажностью 70 %, освещенностью 4 kLx.

4.

Через 4–6 недель зарисовать результаты работы.

5. Побеги перенести в пробирки со средами для пролиферации побегов: МС +1–2 мг/л 6-ЕАП, 1 мг/л НУК.

6. Перенести побеги на среды для индукции корнеобразования: МС без гормонов, МС +1–2 мг/л ИМК + 1 мг/л ГК и поместить на 20 дней в темноту.

ТЕРМИНОЛОГИЯ

In vitro — выращивание растительных объектов «в стекле» (пробирке, колбе, биореакторе) на искусственных питательных средах, в асептических условиях.

Тотипотентность — свойство соматических клеток полностью реализовать генетический потенциал целого организма.

Омнипотентность ядер — сохранение ядрами соматических клеток растений всех потенций ядра зиготы, то есть сохранение всей генетической информации.

Культура тканей in vitro — выращивание в длительной пересадочной культуре тканей, возникших путем пролиферации клеток изолированных сегментов разных органов или самих органов растений.

Культура органов in vitro — асептическое выращивание на искусственной питательной среде в пересадочном режиме изолированных корней, стеблевых апексов, незрелых частей цветка, незрелых плодов.

Культура корней in vitro — асептическое выращивание на искусственной питательной среде в пересадочном режиме изолированных корней.

Культура меристем in vitro — асептическое выращивание на искусственной питательной среде изолированного апекса или пазушной почки побега конуса нарастания с одним или двумя листовыми примордиями.

Культура суспензионная или культура клеток in vitro — асептическое выращивание отдельных клеток или их небольших групп во взвешенном состоянии в жидкой питательной среде.

Культура зиготических зародышей in vitro — асептическое выращивание на искусственной питательной среде незрелых или зрелых изолированных зародышей.

Апекс — верхушечная часть стебля или корня.

Меристема — образовательная ткань с мелкими, активно делящимися клетками.

Апикальное доминирование — явление подавления роста боковых почек побега в присутствии терминальной почки.

Адвентивные почки — почки, возникшие из тканей и клеток растения, обычно их не образующих.

Фитогормоны — (гормоны растений) — биолигически активные соединения, образующиеся в растениях в малых количествах, вызывающие специфический ростовой или формообразовательный эффект.

Ауксины — фитогормоны (ИУК, НУК, 2,4-Д), активизирующие ррост стеблей и корней, стимулирующие образование корней у проростков.

Цитокинины — фитогормоны (кинетин, 6-ЕАП), активизирующие развитие меристем, стимулирующие образование почек.

Гиббереллины — фитогормоны (ГК и др.), активизирующие рост стеблей, вызывающие прорастание семян.

ГК — гибберелловая кислота

ИУК — ?-индолилуксусная кислота

НУК — ?-нафтилуксусная кислота

2,4-Д — 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота

6-БАП — 6-бензиламинопурин

Клональное микроразмножение или микроклональное размножение — получение in vitro неполовым путем растений, генетически идентичных исходному (метод вегетативного размножения растений в культуре in vitro).

Эксплант фрагмент ткани или органа, инкубируемый на питательной среде самостоятельно или используемый для получения первичного каллуса.

Пролиферация — новообразование клеток и тканей путем размножения уже существующих.

Дедифференциация — переход специализированных клеток к пролифирации и неорганизованному каллусному росту (утрата клетками специализации).

Редифференциация — переход специализированных клеток из одного состояния дифференцировки в другое с предшествующими делениями или непосредственно.

Дифференциация — комплекс процессов, приводящих к различиям между клетками.

Дифференцировка — состояние специализации клеток, отличающее их от других.

Морфогенез in vitro — процесс формообразования, то есть заложения, роста и развития клеток (цитогенез), тканей (гистогенез) и органов (органогенез) в культуре клеток и тканей in vitro.

Ризогенез — процесс заложения, роста и развития корней.

Регенерация — восстановление целостного организма из клетки, ткани, органа.

Эмбриондогенез — процесс образования зародышеподобных структур (эмбриоидов) неполовым путем в культуре тканей и клеток in vitro.